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标题:怎样提高合成肽的免疫原性
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请提供具体的免疫方法。谢谢!

127.0.0.1 2008-03-03 23:57
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2

ProteinChem:

简单,方法不过就是将合成肽偶联到一个免疫性强的载体并且将其固体化.

方法很多, 得看抗体的应用. 任何多肽都能产生抗体,包刮单个氨基酸. 但是缠生的抗体有没有应用价值就难说了. 所以,最关键的问题不是多肽的免疫性, 而是多肽的设计, 这关系到所产生的抗体的功能与应用.

比如, 用多肽作为免疫原产生抗HIV病毒的疫苗是最理想不过. 那麽HIV病毒外衣糖蛋白与淋巴细胞粘合的多肽位点在哪呢? 这是重点. 然后就算知道了位点,没有多糖的合成肽,能产生抗体没问题,但能否产生阻断病毒与淋巴细胞结合的抗体却是问题. 且不说病毒疫苗志在诱发细胞免疫而不是体液免疫.

我可以让单个氨基酸具有抗原性, 但,设计一个多肽, 能产生对含有这段多肽的蛋白质产生抗原-抗体反应的抗体, 是最困难的. 然而,这又是可能的. 而可能性,就取决于多肽的设计,偶联的方法, 免疫程序的优化.

59.172.84.188 2008-03-03 23:58
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3

biobang:

一般决定一个表位的氨基酸也要5-10个氨基酸,那为什么单个的氨基酸会产生抗原性?你认为多肽的设计很重要,这我很赞同。我现在有一个蛋白,已经作了单抗,但是我现在要找对其中的一个表位有特异性的单抗,所以我用表位预测软件对抗原的表位进行了预测,选取了所需要的表位的氨基酸序列合成了多肽,通过偶联KLH进行免疫。因为我没有作过多肽的免疫,不知道和正常的蛋白免疫方法是否一样的程序?

59.172.84.188 2008-03-03 23:58
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ProteinChem :
5-10个氨基酸是说明这一段游离多肽的物理性状可能和它在蛋白质中的物理性状一样. 比如ALPHA螺旋结构,是由有5个残基以上的氢键来决定. 单个氨基酸是半抗原, 当然有抗原性.但抗单个氨基酸的抗体未必能与蛋白质中的单个氨基酸产生免疫亲和反应. 用软件预测抗原性是毫无意义的, 直接用碳末端的序列为最好. 因为大多数情况下, 碳末端的序列不参予蛋白质的空间折叠,蛋白酶的降解. 雇用碳末端序列缠生的抗体, 有20%以上的可能性能与原蛋白结合.

因为大量生产多肽抗体,故我常用人血清蛋白做载体, 化学固定于多聚体. 100%能产生抗体.        

 

 

59.172.84.188 2008-03-03 23:59
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5
cnlink :
关于小分子多肽产生免疫原性的问题,有一些文章上讲的比较好:
1,可以和大分子蛋白偶链;
2,可以合成树枝状的的短肽,就是你的这几个肽通过Lys为中心,形成一个比较大的分子团,这样就有较大的免疫原性。
3,几段肽可以首尾结合连到一起
4,添加分子内佐剂。。。。。
59.172.84.188 2008-03-04 00:01